猴痘疫情再爆發(fā)，全式金生物高品質(zhì)核酸檢測原料助力檢測
猴痘新毒株爆發(fā)，再引關(guān)注
2024年8月14日，世界衛(wèi)生組織二度宣布猴痘疫情構(gòu)成“國際關(guān)注的突發(fā)公共衛(wèi)生事件”。
8月15日，海關(guān)總署發(fā)布關(guān)于防止猴痘疫情傳入我國的公告，引發(fā)公眾關(guān)注。
這是自2022年7月以來第二次就猴痘疫情發(fā)出最高級別警報，引起國際社會高度關(guān)注。
猴痘病毒病原學
猴痘屬于痘病毒科、脊索病毒亞科、正痘病毒屬[1]。病毒顆粒較大（200-250 nm），痘病毒呈磚狀，周圍有脂蛋白包膜，內(nèi)含線性雙鏈DNA基因組[2-3]。目前，猴痘病毒有兩大分支，分別是剛果盆地（中非）分支和西非分支，本次非流行國家部分病例病毒測序結(jié)果為西非分支[4]。
猴痘病毒（見彩色透射電子顯微照片），來源：UK Health Security Agency/Science Photo Library
猴痘病毒的流行病學
猴痘是一種人畜共患病，1958年首次在圈養(yǎng)猴子身上發(fā)現(xiàn)因此被命名為猴痘病毒，現(xiàn)有數(shù)據(jù)表明非洲嚙齒動物是其天然宿主，曾引起過松鼠、大鼠、小鼠、猴子、土撥鼠和人的感染[4-5]。1970年從剛果民主共和國一名懷疑患有天花的兒童身上分離出來猴痘病毒，確診第一例人類病例[6]。自從猴痘病毒被發(fā)現(xiàn)后，非洲以外的地區(qū)也發(fā)生了人類感染猴痘病毒的散發(fā)性集群病例[7-12]。并在近期，已有多個國家報道發(fā)現(xiàn)猴痘確診病例。
· 2003年，從加納進口的岡比亞巨鼠感染了土撥鼠進而導致53例人類猴痘病例。
· 2018-2021年，共有5起發(fā)生在有尼日利亞旅居史的人感染猴痘病例的報道。
· 2022年5月26日，世衛(wèi)組織表示猴痘病毒已經(jīng)蔓延到20多個國家。
· 2024年8月14日，世界衛(wèi)生組織二度宣布猴痘疫情構(gòu)成“國際關(guān)注的突發(fā)公共衛(wèi)生事件”。
猴痘病毒傳播途徑和風險
猴痘病毒也可通過密切接觸了感染者或者感染動物的呼吸道分泌物、皮膚或粘膜損傷、血液、體液或最近被病人體液或病變材料污染的物品而造成人際間傳播[13]。此外，猴痘病毒還可經(jīng)由母嬰傳播和性傳播。
猴痘病毒感染的臨床癥狀
猴痘病毒感染癥狀與天花相似，但臨床嚴重程度較輕，潛伏期通常為5至21天，以全身性的發(fā)熱、頭痛、肌肉酸痛或淋巴結(jié)腫大，皮膚性的丘疹、水皰或者膿皰，以及并發(fā)其他病原微生物感染等癥狀為主，持續(xù)時間為2-5周[14]。
猴痘病毒與天花病毒的異同
自從20世紀70年代一場與天花密切相關(guān)的病毒的根除運動結(jié)束以來，科學家們一直在關(guān)注猴痘，發(fā)現(xiàn)在天花根除后的每一年，對這些病毒免疫力減弱或沒有免疫力的人群都在增加。
猴痘與天花的相同點：
· 近親，同屬于正痘病毒屬。
· 抗原性、生物學特性、形態(tài)、結(jié)構(gòu)等方面十分相似。
· 典型癥狀臨床表現(xiàn)相似。
猴痘與天花的不同點：
· 感染對象不同：猴痘感染人類和動物，天花僅能感染人類。
· 傳播方式不同：猴痘可發(fā)生動物傳人、人傳人，天花只在人和人之間傳播。
· 致死率不同：猴痘致死率為1%-10%，天花致死率約30%。
· 潛伏期不同：猴痘的潛伏期為6-16天，也可能在5-21天，天花的潛伏期為7-17天。
· 猴痘人際間傳播效率遠低于天花，癥狀明顯輕于天花。
猴痘病毒顆粒，來源：英國《新科學家》雜志網(wǎng)站 天花病毒顆粒，來源：中國《顯微鏡下的疾病與藥物》
嚴防輸入
盡管歐洲猴痘感染人數(shù)可能進一步增加，但流行病學家認為，歐洲猴痘疫情不太可能發(fā)展成全球流行病。而且，世衛(wèi)組織數(shù)據(jù)顯示，天花疫苗對猴痘病毒的有效性高達85%。目前，我國還從未報道過發(fā)現(xiàn)猴痘確診病例，也沒有在動物宿主中發(fā)現(xiàn)該病毒，目前的重點是外防輸入。中國疾控中心病毒病預防控制所研究人員表示“猴痘和天花雖有諸多相似之處，但在臨床致病性及感染傳播特性方面，它們并不相同，猴痘成為天花那樣的烈性傳染病的可能性微乎其微”。
猴痘病毒檢測方法
猴痘感染可通過病毒分離培養(yǎng)技術(shù)，或通過PCR技術(shù)從猴痘患者皮損標本中檢測出猴痘基因組DNA片段來確認，也可通過電子顯微鏡觀察、正痘病毒抗原的免疫組織化學染色、抗正痘病毒IgM(表明最近接觸)和IgG(表明以前接觸或接種)的血清研究進行檢測[15]。此外，如患者存在近期到流行地區(qū)的旅居史、接觸從流行地區(qū)進口的野生動物、接觸受感染的動物或人，這些線索均有助于建立鑒別診斷。
目前，我國已建立起多種早期猴痘病毒檢測的技術(shù)，如qPCR技術(shù)，可在短時間內(nèi)對痘病毒做出早期篩查診斷，結(jié)合新一代測序方法可對猴痘病毒的來源與傳播鏈進行分子溯源。
產(chǎn)品推薦
全式金作為國內(nèi)優(yōu)質(zhì)分子診斷原料供應(yīng)商，擁有18年分子生物學產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗，深耕分子酶領(lǐng)域，可提供從病毒核酸提取到檢測所需的核心原料，助力猴痘病毒分子診斷產(chǎn)品的研發(fā)。
病毒核酸提取
柱提法 ：
EasyPure? Viral DNA/ RNA Kit (ER201)
磁珠法：
MagicPure? Simple Viral DNA/RNA Kit (EC311)
自動化：
MagicPure? Simple 32 Viral DNA/RNA Kit (EC311-32)
MagicPure? Simple 96 Viral DNA/RNA Kit (EC311-96)
MagicPure? Fly 96 Viral DNA/RNA Kit (EC331-96)
自動核酸提取儀：
· 觸屏操控，自由編程
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· 精確控制，高效控溫
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· 結(jié)果穩(wěn)定，高效提取
TS-32 自動核酸提取儀 TS-96 自動核酸提取儀
病毒核酸檢測
全式金推出的PerfectStart? II Probe qPCR SuperMix UDG在PCR體系中加入熒光探針，通過熒光量的檢測測定樣本核酸量，其組分中含有PerfectStart? Taq熱啟動酶及特殊優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液，可更加高效、精準完成qPCR檢測。
產(chǎn)品特點：
· 3種抗體封閉，特異性高，靈敏度高，擴增效率高；
· 特殊優(yōu)化的qPCR反應(yīng)緩沖液，可提供更高的靈敏度和特異性；
· 使用UDG酶和dUTP，有效防止PCR產(chǎn)物污染，數(shù)據(jù)準確；
· 適用范圍廣，已成功用于非洲豬瘟病毒、偽狂犬病病毒、哈維氏弧菌、蝦肝腸胞蟲和副溶血性弧菌等檢測；
· 穩(wěn)定性好，在反復凍融、預混液、常溫、37℃等條件下保存，均可穩(wěn)定擴增。
· 提供可凍干版本。
實驗數(shù)據(jù)：
多重PCR檢測
以牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）cDNA、豬藍耳病病毒（PRRSV）cDNA、非洲豬瘟病毒（ASFV）質(zhì)粒、偽狂犬病病毒（PRV）gDNA混合物為模板，進行qPCR檢測。結(jié)果表明，TransGen產(chǎn)品可進行4重檢測。
高靈敏度、高擴增效率
分別以不同濃度豬藍耳病病毒（PRRSV）cDNA（10 pg、0.1 pg、0.01 pg）為模板，使用TransGen、Company V、Company T產(chǎn)品進行qPCR檢測。結(jié)果表明，TransGen產(chǎn)品靈敏度可達0.1 pg，擴增效果優(yōu)于Company V與Company T。
分別以不同濃度牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）cDNA（100 pg、1 pg、0.1 pg）為模板，使用TransGen、Company V、Company T產(chǎn)品進行qPCR檢測。結(jié)果表明，TransGen產(chǎn)品靈敏度可達0.1 pg，擴增效果優(yōu)于Company V與Company T。
適用范圍廣
TranGen產(chǎn)品可成功對不同濃度（107 copies/ml-104 copies/ml，10倍稀釋）的哈維氏弧菌、蝦肝腸胞蟲和副溶血性弧菌DNA進行檢測。
穩(wěn)定性好
批次穩(wěn)定性（單重）
使用不同批次的TransGen產(chǎn)品進行單重qPCR檢測。結(jié)果表明，TransGen產(chǎn)品可保障穩(wěn)定的批次重復性。
批次穩(wěn)定性（四重）
使用不同批次的TransGen產(chǎn)品進行四重qPCR檢測。結(jié)果表明，TransGen產(chǎn)品可保障穩(wěn)定的批次重復性。
凍融穩(wěn)定性（單重）
使用0、5、10、15、20次反復凍融保存處理后的TransGen產(chǎn)品進行單重qPCR檢測。結(jié)果表明，反復凍融后TransGen產(chǎn)品性能不受影響，仍可穩(wěn)定擴增。
凍融穩(wěn)定性（四重）
使用0、5、10、15、20次反復凍融保存處理后的TransGen產(chǎn)品進行四重qPCR檢測。結(jié)果表明，反復凍融后TransGen產(chǎn)品性能不受影響，仍可穩(wěn)定擴增。
預混穩(wěn)定性（單重）
將單重檢測基因的引物探針與TransGen產(chǎn)品進行預混，并在不同溫度處理7天后進行qPCR檢測。結(jié)果表明，TransGen預混液在不同溫度保存后仍可穩(wěn)定擴增。
預混穩(wěn)定性（雙重）
將雙重檢測基因的引物探針與TransGen產(chǎn)品進行預混，并在不同溫度保存7天后進行qPCR檢測。結(jié)果表明，TransGen預混液在不同溫度保存后仍可穩(wěn)定擴增。
預混穩(wěn)定性（三重）
將三重檢測基因的引物探針與TransGen產(chǎn)品進行預混，并在不同溫度保存7天后進行qPCR檢測。結(jié)果表明，TransGen預混液在不同溫度保存后仍可穩(wěn)定擴增。
參考文獻
[1] Monkeypox. Marlyn Moore; Farah Zahra.Update May 22, 2022.
[2] Monkeypox Virus in Nigeria: Infection Biology, Epidemiology, and Evolution. Viruses. 2020.
[3] Genomic variability of monkeypox virus among humans, Democratic Republic of the Congo. Emerg Infect Dis. 2014.
[4] 猴痘診療指南.2022.
[5] Monkeypox. Wkly Epidemiol Rec. 2011.
[6] A human infection caused by monkeypox virus in Basankusu Territory, Democratic Republic of the Congo. Bull World Health Organ. 1972.
[7] Update: multistate outbreak of monkeypox--Illinois, Indiana, Kansas, Missouri, Ohio, and Wisconsin, 2003. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2003.
[8] Diagnosis of Imported Monkeypox, Israel, 2018. Emerg Infect Dis. 2019.
[9] Imported Monkeypox, Singapore. Emerg Infect Dis. 2020.
[10] Family cluster of three cases of monkeypox imported from Nigeria to the United Kingdom, May 2021. Euro Surveill. 2021.
[11] Monkeypox in a Traveler Returning from Nigeria - Dallas, Texas, July 2021. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2022.
[12] Imported Monkeypox from International Traveler, Maryland, USA, 2021. Emerg Infect Dis. 2022.
[13] Modelling human-to-human transmission of monkeypox. Bull World Health Organ. 2020.
[14] Human Monkeypox: Epidemiologic and Clinical Characteristics, Diagnosis, and Prevention. Infect Dis Clin North Am. 2019.
[15] Human monkeypox. Clin Infect Dis. 2014.
