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產(chǎn)品中心

mRNA Capping Kit

mRNA加帽酶試劑盒

目錄號(hào): LC101-01

單 價(jià):¥3300

規(guī)格:
25 rxns
100 rxns
數(shù)量:
-
+
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產(chǎn)品詳情介紹

本產(chǎn)品包含牛痘病毒加帽酶、mRNA帽結(jié)構(gòu)2’-O-甲基轉(zhuǎn)移酶和其他加帽反應(yīng)組分,可用于對(duì)T7體外轉(zhuǎn)錄(JT101)產(chǎn)生的RNA進(jìn)行5’加帽修飾。

真核生物中,轉(zhuǎn)錄形成原始mRNA后需要在5'端形成一個(gè)特殊的帽子結(jié)構(gòu),此結(jié)構(gòu)對(duì)于mRNA的穩(wěn)定、轉(zhuǎn)運(yùn)(出核)、翻譯過(guò)程均有重要作用。通過(guò)加帽酶的酶促反應(yīng)對(duì)RNA的5’端進(jìn)行加帽修飾是一種簡(jiǎn)單有效的方法:牛痘病毒加帽酶 (Vaccinia Capping Enzyme)能夠?qū)?-甲基鳥(niǎo)苷酸帽子 (m7Gppp,Cap0)連接至RNA 5’端,形成m7Gppp5’N-mRNA (Cap0-mRNA);mRNA帽結(jié)構(gòu)2’-O-甲基轉(zhuǎn)移酶 (mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase)以Cap0-mRNA為底物,以SAM (S-腺苷甲硫氨酸)作為甲基供體將Cap0-mRNA 5’端緊鄰帽結(jié)構(gòu)的第一個(gè)核苷酸的2'-OH甲基化,形成Cap1-mRNA。Cap1結(jié)構(gòu)能夠提高mRNA穩(wěn)定性,有助于增強(qiáng)其細(xì)胞轉(zhuǎn)染和顯微注射實(shí)驗(yàn)中的表達(dá)能力。

本產(chǎn)品通過(guò)在加帽反應(yīng)中同時(shí)使用牛痘病毒加帽酶和mRNA Cap-2'-O-甲基轉(zhuǎn)移酶,使得加帽反應(yīng)可以在同一體系中完成,反應(yīng)產(chǎn)物為Cap1-mRNA,加帽效率可接近100%,并且帽子結(jié)構(gòu)方向正確。

產(chǎn)品組成

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實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

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熒光鏡檢和流式細(xì)胞分選結(jié)果表明,TransGen產(chǎn)品加帽修飾的mRNA轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞后的表達(dá)效率顯著高于Company N產(chǎn)品。


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熒光鏡檢和流式細(xì)胞分選結(jié)果表明,利用TransGen mRNA體外合成系列產(chǎn)品(LC101)合成的mRNA毒性低、穩(wěn)定性好、翻譯效率高,在不同類(lèi)型的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中成功且穩(wěn)定表達(dá)。



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